Reconstitución de péptidos: cómo reconstituir paso a paso

La reconstitución de péptidos es el paso de disolver un péptido liofilizado en un solvente para obtener una solución de concentración conocida, y se hace con técnica aséptica y con un volumen que se calcula, no que se estima.

Qué es la reconstitución de péptidos

Un péptido llega como liofilizado, un sólido seco y estable. Reconstituirlo es devolverlo a solución: se añade un volumen conocido de solvente al frasco, se disuelve el sólido y se calcula la concentración resultante. A partir de ese momento el péptido está expuesto a las vías de degradación de péptidos en solución, y por eso cada paso importa.

Esta guía describe el procedimiento de laboratorio. No incluye dosis, ni pautas de uso, ni conversiones a unidades de jeringa: el volumen de solvente y el plazo de uso de una solución los fija el protocolo del ensayo.

Elegir el solvente

Lo fija el protocolo. Los dos más usados son el agua estéril y el agua bacteriostática, que lleva alcohol bencílico al 0,9 % como conservante. Para un ensayo con células, el alcohol bencílico puede no ser compatible, y el protocolo, no el catálogo, decide. Si el péptido tiene una particularidad, su ficha la dice: el complejo GHK-Cu, por ejemplo, forma una solución azulada y su cobre puede desplazarlo un quelante como el EDTA.

El pH y la concentración influyen en la estabilidad física de un péptido en solución, y también la agitación y las superficies con las que toca. ¹

Técnica aséptica, paso a paso

Deja que el frasco liofilizado y el solvente estéril lleguen a temperatura ambiente.
Desinfecta los tapones de goma de ambos con alcohol isopropílico al 70 %.
Mide el volumen de solvente que fije el protocolo.
Haz caer el solvente despacio por la pared de vidrio, sin dirigirlo al polvo.
Gira el frasco con suavidad hasta que el sólido se disuelva por completo. No lo agites.
Calcula la concentración y anótala en la etiqueta, con el solvente, el volumen y la fecha.
Guarda la solución en refrigeración, de 2 a 8 °C, sin agitarla ni exponerla a cambios de temperatura.

Calcular la concentración y la molaridad

La concentración en mg/mL es la masa declarada de péptido del frasco dividida entre el volumen de solvente; es una cifra nominal, porque el polvo lleva además agua y contraiones (pureza de un péptido). La molaridad se obtiene dividiendo esa concentración entre la masa molecular y multiplicando por 1 000, lo que da mmol/L. Si el frasco tiene 10 mg y se añaden 2 mL, la concentración es de 5 mg/mL, y la molaridad depende de la masa de cada péptido, como muestra la tabla.

Ejemplo: un frasco de 10 mg en 2 mL de solvente
Molécula	Masa molecular	Concentración	Molaridad
Retatrutide 10 mg	4 731 Da	5 mg/mL	1,06 mmol/L
Tirzepatida 10 mg	4 813,5 Da	5 mg/mL	1,04 mmol/L
GHK-Cu (ejemplo; se vende en 50 y 100 mg)	402 Da	5 mg/mL	12,44 mmol/L
BPC-157 10 mg	1 419,5 Da	5 mg/mL	3,52 mmol/L
TB-500 10 mg	889,0 Da	5 mg/mL	5,62 mmol/L
Ipamorelin 10 mg	711,9 Da	5 mg/mL	7,02 mmol/L
Tesamorelin 10 mg	5 135,9 Da	5 mg/mL	0,97 mmol/L
Epitalon 10 mg	390,3 Da	5 mg/mL	12,81 mmol/L
Selank 10 mg	751,9 Da	5 mg/mL	6,65 mmol/L
AHK-Cu (ejemplo; se vende en 50 mg)	≈ 416 Da	5 mg/mL	12,02 mmol/L
Somatropina 10 mg	22 125 Da	5 mg/mL	0,23 mmol/L
MOTS-c 10 mg	2 174,6 Da	5 mg/mL	2,30 mmol/L
NAD+ (ejemplo; se vende en 500 mg)	663,4 Da	5 mg/mL	7,54 mmol/L
Glutatión (ejemplo; se vende en 600 mg)	307,3 Da	5 mg/mL	16,27 mmol/L
Semax (ejemplo; se vende en 5 mg)	813,9 Da	5 mg/mL	6,14 mmol/L
Bremelanotida 10 mg	1 025,2 Da	5 mg/mL	4,88 mmol/L
Melanotan 2 10 mg	1 024,2 Da	5 mg/mL	4,88 mmol/L
Kisspeptina-10 10 mg	1 302,4 Da	5 mg/mL	3,84 mmol/L
Melanotan 1 10 mg	1 646,8 Da	5 mg/mL	3,04 mmol/L

Cálculo con la masa molecular de cada ficha; la masa de los complejos de cobre de GHK-Cu y AHK-Cu es aproximada. NAD+ no es un péptido, la somatropina es una proteína y el glutatión une sus residuos por un enlace γ, pero la cuenta es la misma. El volumen de solvente de cada ensayo lo fija su protocolo.

En una mezcla, cada péptido tiene su propia concentración: un frasco de CJC-1295 + ipamorelin de 10 mg (5 + 5) en 2 mL da 2,5 mg/mL de cada uno, unos 0,742 mmol/L de CJC-1295 sin DAC y 3,51 mmol/L de ipamorelin, y la ficha de cada mezcla trae su cuenta. En una sal, como 5-Amino-1MQ, la molaridad depende de si los miligramos declarados son del catión o de la sal con su contraión.

Para otros volúmenes y presentaciones, la calculadora de concentración hace la cuenta y la muestra paso a paso.

Qué evitar al reconstituir un péptido

Agitar el frasco. La agitación favorece la agregación y la formación de espuma en la interfaz; un giro suave basta. ¹
Suponer un volumen. Una concentración estimada y no calculada hace imposible repetir un ensayo.
Mezclar la guía con una pauta de uso. El volumen y el plazo de uso salen del protocolo del ensayo, no de una tabla de este sitio.

Preguntas frecuentes

¿Con qué se reconstituye un péptido liofilizado?

Con el solvente que fije el protocolo: agua estéril, agua bacteriostática u otro diluyente. Para un ensayo celular, el alcohol bencílico de la bacteriostática puede ser incompatible.

¿Cómo se calcula la molaridad de un péptido reconstituido?

Se divide la concentración en mg/mL entre la masa molecular en Da y se multiplica por 1 000, lo que da mmol/L.

¿Cuánto dura un péptido reconstituido?

Lo fija el protocolo del laboratorio: depende de la secuencia, el pH, la temperatura, la agitación y las superficies. ¹ La solución se guarda en refrigeración y se anota la fecha.

Referencias científicas

Zapadka KL, Becher FJ, Gomes Dos Santos AL, et al. Factors affecting the physical stability (aggregation) of peptide therapeutics. Interface Focus. 2017;7(6):20170030. PubMed 29147559 DOI

Productos del catálogo relacionados

RetatrutideAgonista triple de los receptores de GIP, GLP-1 y glucagón, con ensayos de fase 3 publicados. $1,400 MXN10 mg
TirzepatidaAgonista dual de GIP y GLP-1, principio activo de medicamentos con registro, con ensayos de fase 3 en obesidad y diabetes tipo 2. $1,250 MXN20 mg
GHK-CuComplejo de cobre(II) del tripéptido GHK, descrito en estudios de reparación de tejidos y de piel que salen casi todos del mismo grupo. $449 MXN50 mg
BPC-157Pentadecapéptido sintético estudiado sobre todo en roedores, con tres estudios piloto en personas. $650 MXN5 mg
TB-500Fragmento acetilado de la timosina β4 que contiene su región de unión a actina, estudiado en reparación de heridas. $800 MXN5 mg
IpamorelinPentapéptido que activa el receptor de grelina y libera hormona de crecimiento sin elevar ACTH ni cortisol en su estudio original. $1,200 MXN10 mg
TesamorelinAnálogo de GHRH de 44 residuos, principio activo también de un medicamento que la FDA aprobó en 2010. $2,000 MXN10 mg
EpitalonTetrapéptido Ala-Glu-Asp-Gly descrito en estudios de telomerasa y de envejecimiento. $720 MXN10 mg
SelankHeptapéptido análogo de la tuftsina, estudiado en modelos de ansiedad y en dos estudios clínicos pequeños. $1,100 MXN10 mg
Agua bacteriostáticaAgua estéril con alcohol bencílico al 0,9 % como conservante, para reconstituir péptidos liofilizados en el laboratorio. $200 MXN3 mL
AHK-CuComplejo de cobre(II) del tripéptido Ala-His-Lys, pariente de GHK-Cu, estudiado en células del folículo piloso y de la piel. $650 MXN50 mg
SomatropinaHormona de crecimiento humana de 191 aminoácidos obtenida por ADN recombinante, principio activo de medicamentos con registro. $2,500 MXN10 mg
MOTS-cPéptido de 16 aminoácidos codificado en el ADN mitocondrial, estudiado en ratones en el metabolismo y el declive físico con la edad. $850 MXN10 mg
NAD+Nicotinamida adenina dinucleótido oxidada, la coenzima redox que consumen las sirtuinas y las PARP y que baja con la edad en los tejidos. $1,100 MXN500 mg
GlutatiónGlutatión reducido, el tripéptido γ-Glu-Cys-Gly, principal antioxidante propio de la célula. $700 MXN600 mg
SemaxHeptapéptido Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro, análogo de ACTH(4-10) sin actividad suprarrenal, estudiado en ratas en BDNF e isquemia. $500 MXN5 mg
BremelanotidaAgonista de los receptores de melanocortina MC3R y MC4R, principio activo de un medicamento aprobado por la FDA para el deseo sexual hipoactivo. $900 MXN10 mg
Melanotan 2Análogo cíclico de la α-MSH estudiado en la pigmentación de la piel y la erección, del que derivó bremelanotida. $850 MXN10 mg
Kisspeptina-10Decapéptido final de la kisspeptina que activa GPR54 y, por la GnRH, eleva la LH; estudiado en la fisiología reproductiva humana. $1,000 MXN10 mg
Melanotan 1Afamelanotida, análogo lineal de la α-MSH que activa MC1R y aumenta la pigmentación; principio activo de un medicamento para la protoporfiria eritropoyética. $770 MXN10 mg
CJC-1295 + ipamorelinCJC-1295 sin DAC e ipamorelin en partes iguales: un análogo de GHRH y un secretagogo del receptor de grelina en el mismo frasco. $1,600 MXN10 mg
5-Amino-1MQMolécula pequeña que inhibe la enzima NNMT y elevó el NAD+ en células; estudiada en ratones y adipocitos. $1,250 MXN50 mg

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